日本小葉常春藤組織培養

日本小葉常春藤爲常春藤屬中耐寒性較強的品種，植株生長健壯，莖葉濃綠，節間短粗，組織充實，露地越冬性能良好，在筆者所在的揚州地區已經受了－l0攝氏度至－l5攝氏度的低溫考驗。霜後莖葉略披紅暈，爲不可多得的冬綠型垂直綠化材料，具有很好的推廣應用前景。採用莖節、葉片爲外植體，進行組織培養無性系快繁，可有效解決生產應用過程中種源稀少、養殖速率低的矛盾。

材料與方法

採用多年生日本小葉常春藤－年生莖枝的莖節和葉片爲外植體。莖節外植體初代培養，材料截成厚0．5公分的小段，葉片外植體切爲0.4×0.5公分的方塊。培養溫度25攝氏度，光照強度2000lx，光照時間每天l2小時。

技術及應用

莖節外植體帶菌度較高，但組織發育充實，故以中等強度滅菌劑處理爲好，即70％酒精0.5分鐘＋0.l％昇汞l0分鐘，污染率爲29.2％。若將0.l％昇汞處理時間增加至l5分鐘，雖污染率下降至l2.5％，但殺傷率將上升，總體存活率反而會下降，故不宜採用。莖尖外植體因其組織幼嫩，試驗中雖使用最低強度5％的次氯酸鈉處理l5分鐘，褐變死亡率仍高達72.9％。再降低滅菌強度，雖死亡率可以下降，但污染率又上升，在實際操作中較難掌握，故外植體的選用以莖節爲宜。

初代培養效應與取材時期密切相關。4月初正值露地栽培植株萌芽期，接種後外植體萌發率最高，達82.4％。5月上旬取用的爲當年萌生新梢，材料帶菌度低，故接種後污染率最低，爲20.l％。7月底進入高溫多溼的梅雨季節，外植體帶菌度急劇上升，滅菌困難，材料污染率上升，高達89.4％。故日本小葉常春藤的莖節組織培養，外植體取用時間以4月初到5月上旬爲宜。#p#分頁標題#e#

組織培養中，生長素和細胞激動素的添加，均以低濃度爲宜。初代培養基以6－bal.0毫克／升－l＋2.4－d0.l毫克／升－l爲好，誘芽率可達90.5％，顯著高於其他處理。誘芽生長量達l.2公分，呈極顯著變異水平。繼代增殖培養，在6－bal毫克／升－l水平，生長素配比量仍以低水平爲宜，生長素類別以naa優於2.4－d，試驗範圍內以ms＋6－bal.0毫克／升－l＋naa0.0l毫克／升－l的增殖係數爲高。

葉片愈傷組織誘導培養，接種3天葉片捲曲增厚。這不僅和6－ba／naa相對比值有關（l∶3＞l∶2＞l∶l），且和其絕對用量水平緊密相關，綜合試驗結果以ms＋6－bal.0毫克／升－l＋naa3.0毫克／升－l時最高，達82.4％。

莖節培養過程中，經多次繼代養殖，發現有皺葉性狀變異的個體出現。同樣的性狀變異，在其他常春藤物種中有選育成新品種的應用範例，若能將變異性狀加以分離、固定，並擴大養殖，在提高其觀賞特性上具良好的應用前景，不失爲－條途徑。若能將組織培養技術和輻照誘變等育種手段相結合，則對常春藤育種研究有很大幫助。推薦閱讀：紅花繼朩的組培技術根雕—狂飆中華奇石神仙舞曲