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蝴蝶蘭的組織培養技術

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蝴蝶蘭的組織培養技術蝴蝶蘭爲蘭科多年生附一一生草本,又名蝶蘭,是蘭科植物中栽培最爲廣泛的種類之-,主要分佈在熱帶及亞熱帶地區。其花形奇特,色彩豔麗,花期持久,素有“蘭中皇后”的美譽,具有極高的觀賞和經濟價值,在國內外花卉巿場上極受歡迎。蝴蝶蘭是單莖氣生蘭,植株上極少發育側枝,比其他種類的蘭花更難於進行常規無性養殖。組織培養是建立蝴蝶蘭快速養殖無性系的重要手段。

蝴蝶蘭的組織培養技術

l 外植體的選擇

蝴蝶蘭的莖尖、莖段、葉片、花梗側芽、花梗節間、根尖等部位都已有培養成功的報道,方法各異,難度各有高低。蝴蝶蘭不同外植體的成活率有差異,其中花梗側芽的成活率最高,達75%。其次爲花梗,成活率爲 62.5%。葉片和根尖最差,分別爲l2.5%和 7.5%。針對不同外植體,取材方法也不同,通常取花梗節之間l~2公分長的幼嫩部分,切取長 2~3毫米 的切段作爲外植體。

2 基本培養基的選擇

蝴蝶蘭組織培養所採用的基本培養基包括 ms、l/2ms、vw、b5、kc、花寶及其改良型等,其中l/2ms對蝴蝶蘭原球莖增殖效果最好。

3 外源激素的選擇

目前常使用的外源激素主要是生長素類(如iaa、2,4一d和naa)和細胞分裂素類(如ba、zt、kt)。蝴蝶蘭組織培養中常用的細胞分裂素爲 6一ba,較高濃度(l~8mg/l)的 6一ba 能促進蝴蝶蘭原球莖增殖,較低濃度(0.l~0.5mg/l)的 6一ba 則能促進原球莖分化。適宜濃度的 6一ba 配合較低濃度的 naa,更有利於原球莖的增殖,2.0mg/l 6一ba 和 0.3mg/l naa配合使用是蝴蝶蘭原球莖增殖的最佳組合。#p#分頁標題#e#

4 培養基添加物對蝴蝶蘭增殖和分化的影響

蝴蝶蘭組織培養中常加入-些天然物質如椰乳、香蕉泥、番茄汁、蘋果汁等,這些物質能提供-些必要的微量營養成分、生理活性物質和生長激素等,如加入l00~200mg/l香蕉泥,具有較大的 ph 緩衝作用,有利於蘭科植物的壯苗和生根。許多資料也表明,添加適量的香蕉泥、椰乳或含膠質的果菜汁等均對原球莖增殖有明顯促進效果。

適量的添加物對蝴蝶蘭叢生芽的誘導和生根也有-定的促進作用。培養基中添加活性炭,低濃度(0.5~l.0g/l)時對原球莖增殖影響不明顯,但可促進蝴蝶蘭生根。高濃度(2.0~3.0g/l)時對原球莖增殖有促進作用,但原球莖有黃化現象。

蔗糖作爲培養基的能源物質和滲透調節劑,對原球莖的增殖生長影響較大。蔗糖含量爲 2%時,原球莖分化速度最快。蔗糖含量爲2%~3%時,促進芽的形成。蔗糖含量爲5%時,有利於根的分化和生長。蔗糖含量爲3%~5%時,抑制原球莖的分化和生長,分化質量和分化速度都顯著下降。

5 原球莖繼代中褐化的防治

蝴蝶蘭和其它蘭科植物-樣,原球莖狀體在繼代培養過程中易褐變死亡,不易增殖。在培養基中添加l~2g/l活性炭,適時切除培養物的褐化部分並及時更換新鮮培養基,能有效抑制外植體褐變死亡。培養基中加入l0%椰子水,也能促進原球莖的生長,減少原球莖增殖過程中的褐變。蝴蝶蘭的羣體效應很明顯,單芽容易褐化死亡,且增殖較慢,因此,剛誘導出的原球莖狀體不能過早切割轉移,在繼代階段接種時,應儘量避免切成單芽,增殖時切塊也不宜過小,否則容易褐化死亡。6~8月份高溫季節採芽排出的褐變物質多,成活率也最低,所以要避免在夏季採芽。#p#分頁標題#e#

6 外界條件對蝴蝶蘭的影響

培養基的ph值直接影響到培養物對離子的吸收,過酸或過鹼都對植物材料生長有很大影響,此外,瓊脂培養基的ph還影響到凝固情況。原球莖在ph值5.0~5.4的環境中生長最好,叢生芽的誘導與增殖在ph值5.6~5.8的環境中較好。

蝴蝶蘭在組織培養中,通常都以日光燈爲光源,因此,可以人爲地進行控制其光照強弱。光照強度對試管苗髮根和生長勢均有明顯的影響。光照爲3000lx對蝴蝶蘭根誘導和植株生長有利。

在誘導蝴蝶蘭叢生芽過程中,由於所取的花梗芽爲花芽,在培養過程中,較低的溫度影響(l5~22攝氏度)會使大部分花梗芽發育成花芽。在較高溫度(23~26攝氏度)下培養,花梗花芽轉化爲營養芽,所以在進行蝴蝶蘭叢生芽誘導時的適宜溫度條件爲(25±2)攝氏度。

7 生根壯苗及移栽

生根壯苗階段關鍵在於嚴格篩選激素的種類和濃度,-般需降低培養基的激素含量,以便形成健壯苗。常用的生長素有iba(0.3~l.5mg/l)、naa(0.l~0.8mg/l)。添加ga3 + naa 的組合能明顯提高生根率,且植株健壯,長勢好。

蝴蝶蘭屬熱帶氣生蘭,具氣生根,栽培上要求根部通氣良好。現在蝴蝶蘭移栽常用基質有水苔、椰糠、蛇朩、樹皮等,以水苔效果較好。

綜上所述,用組培方法快繁蝴蝶蘭較傳統養殖方法有3個明顯的優點:①節省育苗用地。②節省養殖材料,提高養殖係數。③利用莖尖脫毒培養,挽救因受病毒侵染而退化的優良品種,提高質量和欣賞價值。總之,組培快繁技術可大大提高生產效益和經濟效益。

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